树突状细胞疫苗联合厄洛替尼治疗无法手术的肺腺癌患者：病例报告
抽象的
对于无法切除的晚期肺癌患者，目前尚无令人满意的治疗方法。我们报告了一例无法切除的晚期肺癌患者（IIIb 期：T2aN3M0），该患者接受了总共 15 剂 Wilms 肿瘤 1 和粘蛋白 1 疫苗脉冲的树突状细胞联合小分子表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼治疗，治疗超过 699 天，未出现复发或转移。
一名 63 岁的韩国女性经病理学和计算机断层扫描诊断患有肺腺癌。腺癌显示表皮生长因子受体 (EGFR) 突变，无间变性淋巴瘤激酶表达，程序性死亡配体 1 表达不足 1%。她单独接受厄洛替尼治疗约 1 个月。然后她接受厄洛替尼和用 Wilms 肿瘤 1 和粘蛋白 1 疫苗脉冲的树突状细胞治疗。第一次接种后 48 小时，接种部位红斑直径为 30 毫米。此外，在接种期间，红斑直径维持在 20 毫米以上。这些结果表明疫苗可以诱导抗肿瘤免疫。值得注意的是，根据正电子发射断层扫描/计算机断层扫描和计算机断层扫描的氟脱氧葡萄糖摄取情况，在用 8 剂 Wilms 肿瘤 1 和粘蛋白 1 疫苗脉冲的树突状细胞和厄洛替尼联合治疗 237 天后，肿瘤大小显著减小至 12 毫米，减少了 65.7%。有趣的是，经过 321 天的联合治疗后，临床结果有所改善，并且根据计算机断层扫描没有检测到肿瘤。肿瘤消失的验证在治疗开始后至少持续了 587 天，没有任何复发或转移的迹象。
标准抗癌疗法联合使用Wilms肿瘤1和粘蛋白1疫苗脉冲的树突状细胞可能对此类无法切除的肺腺癌患者产生治疗效果。
背景
肺癌是目前全球癌症相关死亡的主要原因。尽管在这种致命疾病的检测、治疗和管理方面取得了重大进展，但非小细胞肺癌 (NSCLC) 患者的预后通常明显较差 [1]。尽管最近有研究表明伊匹单抗和纳武单抗等免疫检查点抑制剂可以延长总生存期 (OS) 和无进展生存期 (PFS)，但只有少数患者在临床上受益于这些治疗，这表明在 NSCLC 患者中，免疫系统尚未完全发挥其抗肿瘤潜力 [2]。在晚期 NSCLC 患者中，肿瘤微环境 (TME) 的免疫抑制环境限制了患者抗肿瘤免疫反应的诱导 [3]。因此，迫切需要增强免疫系统的新型治疗策略。由于树突状细胞（DC）在适应性免疫反应中的重要作用及其与免疫相关细胞的广泛串扰，DC疫苗可能是NSCLC患者最有前途的细胞疫苗接种策略之一。
树突状细胞 (DC) 疫苗接种策略已被开发为一种克服 TME 中的免疫抑制和促进抗肿瘤免疫反应的治疗方法 [2]。DC 是专门的抗原呈递细胞 (APC)，在启动和调节抗肿瘤 T 细胞反应中起重要作用 [4]。在共刺激分子背景下，DC 上的主要组织相容性复合体 (MHC) 分子与 T 细胞上的 T 细胞受体之间的相互作用对于诱导抗肿瘤免疫至关重要 [3]。使用负载肿瘤相关抗原 (TAA) 衍生肽、肿瘤裂解物、mRNA、DNA 或整个肿瘤细胞的 DC 的癌症疫苗已在临床上应用，并被证明可以在许多癌症患者中诱导抗肿瘤免疫 [4]。在临床试验中，负载 MHC I 类限制性肽的 DC 最常用于诱导抗原特异性 CD8 + 细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL) 反应以消灭肿瘤，包括肺癌 [5]。
维尔姆斯肿瘤基因 WT1 编码一种转录因子，在细胞生长和分化中起重要作用。WT1 基因在多种肿瘤类型中过表达，包括肺癌 [6]。重要的是，根据治疗功能和免疫原性等多项标准，WT1 在 75 种 TAA 的优先级中位居榜首；MUC1 排名第二 [7]。MUC1 是一种细胞膜糖蛋白，在 NSCLC 中也过表达，并且与癌前肺病变的致癌作用有关；因此，MUC1 已被用作癌症疫苗策略的靶点 [8]。有趣的是，表达 WT1 的癌症干细胞会被 WT1 免疫反应彻底消灭，而这对于癌症治愈至关重要；因此，WT1 的这种独特性对癌症治愈大有裨益 [6]。越来越多的临床结果表明，将用 WT1 和/或 MUC1 肽疫苗脉冲的树突状细胞和标准抗癌疗法纳入临床医生的治疗武器库等重大进展可以延长许多癌症患者的 OS 和/或 PFS [5]。重要的是，之前的一份报告表明，用 WT1 和/或 MUC1 肽疫苗脉冲的树突状细胞对延长晚期 NSCLC 患者的 OS 有显著影响 [6]。在这里，我们报告了一例患有晚期腺癌的肺癌患者的病例，该患者通过联合使用树突状细胞疫苗和厄洛替尼取得了出色的治疗效果。
病例介绍
一名 63 岁的韩国女性经计算机断层扫描 (CT) 和氟脱氧葡萄糖 (FDG)-正电子发射断层扫描/CT (PET/CT) 诊断为 IIIb 期 (T2aN3M0) 左下叶肺癌 (35 毫米 × 30 毫米)。CT 引导下肺活检显示腺癌。免疫组织化学显示腺癌显示表皮生长因子受体 (EGFR) 突变，无间变性淋巴瘤激酶 (ALK) 表达，程序性死亡配体 1 (PD-L1) 表达不足 1%。分析的所有血清肿瘤标志物，包括癌胚抗原 (CEA)、碳水化合物抗原 19-9 (CA19-9)、癌抗原 125 (CA125) 和癌抗原 15-3 (CA15-3)，在治疗前均在正常范围内。该患者的东部肿瘤协作组体能状态 (PS) 为 0，器官功能正常，且未接受过化疗。
患者最初接受约 1 个月的厄洛替尼治疗（口服 150 毫克/天）（一种小分子 EGFR 酪氨酸激酶抑制剂）（图 1）。随后患者接受厄洛替尼和用 MHC II 类限制性 WT1 肽和粘蛋白 1 (MUC1) 肽疫苗 (WT1/MUC1-DC) 脉冲的树突状细胞治疗，以诱导 WT1 和 MUC1 抗肿瘤 CTL。在临床环境中，我们没有采用免疫组织化学来选择 WT1 和 MUC1 肽，因为之前的研究表明 WT1 [6] 和 MUC1 [8] 在 NSCLC 中过表达。WT1/MUC1-DC 疫苗的制备与之前的报道一致 [5,9,10]。简而言之，使用 Ficoll-Plaque Premium 密度梯度溶液从白细胞分离产品制备的外周血单核细胞 (PBMC) 生成树突状细胞，如之前所述 [11]。患者的人类白细胞抗原 (HLA) 类型为 HLA-A*(31:01/33:03)、HLA-DRB1*(04:06/13:02) 和 HLA-DPB1*(02:01/04:01)。由于没有仅限于 HLA-A*31:01/33:03 的 WT1 杀伤肽，因此仅使用 II 类结合辅助肽进行 WT1 疫苗接种。因此，WT1 辅助肽 (WT1 332–347；氨基酸序列，KRYFKLSHLQMHSRKH) 用于所有 MHC II 类类型 [11]。MUC1 长肽 (TRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAP) 用于所有 MHC I 类类型 [9]。通过流式细胞术对 WT1/MUC1-DC 疫苗进行表征，以确保其达到专业 APC 的典型表型。表型显示高水平的 HLA-ABC、HLA-DR、CD11c、CD80、CD86、CD83、CD40 和 CCR7 以及低水平的 CD14（图 2）。WT1/MUC1-DC 冷冻保存至给药当天。将 WT1/MUC1-DC 疫苗悬浮液（约 1×107 细胞/剂）用盐水稀释至总体积为 1.0 mL，并以约 2-3 周的间隔皮内注射到双上臂，最多接种七次。我们的方案考虑七次疫苗接种。单次疫苗接种后，可用的疫苗更多，疫苗接种间隔更长。因此，从八次到十次接种，每隔约 1-2 个月给予双倍剂量（约 2×107 细胞/剂）的 WT1/MUC1-DC 疫苗。随后，患者从第 11 次至第 14 次接种疫苗，每 2 个月常规接种一次 WT1/MUC1-DC 疫苗（约 1×107 细胞/剂），以维持抗肿瘤免疫力。最后一次接种疫苗（约 1×107 细胞/剂）是在 14 次接种疫苗后 155 天（治疗后 699 天）进行的（图 1 和表 1）。疫苗的接种与厄洛替尼方案无关。
图 1
治疗方案和肿瘤大小。患者单独接受厄洛替尼（一种小分子 EGFR 酪氨酸激酶抑制剂）治疗约 1 个月。WT1/MUC1-DC 疫苗悬浮液（约 1-2 × 107 细胞/剂）以约 14-21 天的间隔皮内注射到双上臂，与厄洛替尼治疗方案无关。应患者要求，在完成 699 天的治疗后注射了所有 15 剂疫苗。联合治疗 321 天后未检测到肿瘤。治疗开始后至少 587 天内肿瘤消失
图 2
WT1/MUC1-DC 细胞的表型特征。WT1/MUC1-DC 细胞用以下单克隆抗体染色：荧光素异硫氰酸酯 (FITC) 偶联的抗 HLA-ABC、抗 CD14、抗 CD80、抗 CD40 和抗 HLA-DR、抗 CD11c、抗 CD83、抗 CD86 和抗 CCR7。通过双色流式细胞术分析 WT1/MUC1-DC 细胞的表型特征，以确定 HLA-ABC、HLA-DR、CD14、CD11c、CD83、CD80、CD86、CD40 和 CCR7 的表达
评估 WT1/MUC1-DC 疫苗引发的抗肿瘤免疫诱导至关重要。在本例中，我们通过接种部位的红斑大小和中性粒细胞与淋巴细胞比率 (NLR) 评估了抗肿瘤免疫的诱导。红斑大小是在接种疫苗后 48 小时内测量的，因为它与免疫反应的发展有关 [5,9,10]。接种部位在第一次接种后出现 30 毫米直径的红斑，除了 NLR 之外，整个接种期间红斑直径一直保持在 20 毫米以上，Jiang 和 Huai 认为 NLR 是免疫治疗的预后因素和潜在的预测生物标志物 [12,13]。然而，NLR 并未被普遍接受或使用，尽管它得到了在几种（但不是所有）肿瘤类型中获得的数据的支持。在该患者中，NLR 从 4.6（基线）下降到 1.6（13 次接种疫苗后）。值得注意的是，在联合使用 8 个剂量的 WT1/MUC1-DC 和厄洛替尼治疗 237 天后，肿瘤大小显著减小至 12 毫米，减少了 65.7%（图 3）。根据观察到的积极治疗反应，患者要求将厄洛替尼剂量减少至 100 毫克/天。此外，治疗后 321 天的 CT 扫描未发现肺癌（图 3）。此时，已经接种了十次疫苗。治疗开始后至少 587 天内肿瘤消失的迹象持续存在，没有任何复发或转移的迹象（2017 年 12 月至 2019 年 11 月之间；图 3）。此外，疫苗剂量增加到每剂 2×107 细胞（从八剂增加到十剂），而厄洛替尼剂量降低。随后，在注射11-15剂后，疫苗剂量再次减少至约1 × 107细胞。此外，在整个治疗期间注射15剂WT1/MUC1-DCs期间未记录到任何不良事件。由于副作用可以忍受，患者继续服用厄洛替尼。应患者要求，在完成699天的治疗后，注射了全部15剂疫苗。
图 3
CT 和 PET/CT 评估肺癌。患者通过计算机断层扫描 (CT) 和氟脱氧葡萄糖 (FDG)-正电子发射断层扫描/CT (PET/CT) 被诊断为肺癌 (35 mm × 30 mm)。根据 CT 和 PET/CT 的 FDG 摄取情况，在用 8 剂 WT1/MUC1-DC 和厄洛替尼联合治疗 237 天后，肿瘤大小显著减小至 12 mm，减少了 65.7%

扫码免登录支付

本文章为付费文章，是否支付1元后完整阅读？

如果您已购买过该文章，[登录帐号]后即可查看

支付1元