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婴儿扭力病毒致无菌性脑膜炎1例报道

  • 时间:2025-01-26 16:34:35 作者: admin 阅读:155
婴儿细螺旋病毒引起无菌性脑膜炎1例
抽象的
虽然扭力病毒感染的病原体仍未得到确认,但尚未记录扭力病毒引起的无菌性脑膜炎。本研究使用下一代测序和针对扭力病毒抗原的免疫球蛋白 M 反应确定了扭力病毒序列,因此,这将是对扭力病毒感染的全面诊断。
一名 2 个月大的日本男孩因易怒、昏昏欲睡和萎靡不振被送往我们医院。他的检查结果表明可能患有败血性脑膜炎,因此他被收治入院。他开始接受高剂量抗生素和类固醇治疗。住院第三天,他不再发热,一般状况也有所改善,并于第六天出院。出院后长达 1 年内他没有发育问题。使用下一代测序技术对他入院时采集的脑脊液样本进行宏基因组核糖核酸测序病原体检测,发现在总共 1,708,516 个读数中,有三个短读数与细诺病毒中的读数同源。这一发现表明,与其他 13 名患者的细诺病毒阴性脑脊液样本(对照)相比,我们的患者呈阳性。聚合酶链反应显示,Torque Teno 病毒的全基因组序列为 2810 nt。我们从 Torque Teno 病毒中制备了重组 GP2 抗原,并用它来研究患者的抗 Torque Teno 病毒免疫反应。检测到抗 GP2 血清免疫球蛋白 M 反应,为 Torque Teno 病毒感染提供了进一步的支持证据。
本病例推测扭力病毒引起的无菌性脑膜炎病程良好。新一代测序等新技术可以帮助识别此类病例,预计未来病例会不断积累。
背景
细环病毒 (TTV) 是一种普遍存在的病毒,在多种哺乳动物中非常普遍,目前被归类为圆环病毒科和指环病毒属。TTV 具有约 3.8 kb 的单链环状 DNA。人类 TTV 于 1997 年首次报道 [1],流行病学上与多种人类疾病有关,例如呼吸道疾病、自身免疫性疾病和肝炎。然而,由于缺乏有关其发病机制和特定疾病病因的足够信息,它们是否直接与这些疾病有关一直存在争议 [2]。我们在此报告一例与 TTV 相关的无菌性脑膜炎病例。
病例介绍
一名 2 个月大的日本男孩 (KS025) 因烦躁、嗜睡和昏睡被送往我们医院。入院前他咳嗽约 1 周,发烧 3 天。他因面色苍白而入院,检查结果显示他可能患有化脓性脑膜炎。
他出生时孕龄 39 周,出生体重 3788 克。出生时,他因新生儿短暂性呼吸急促被送入新生儿重症监护室 6 天。入院前他已接种过一次针对乙型流感嗜血杆菌 (Hib)、肺炎球菌结合疫苗 (PCV)、轮状病毒 (Rota) 和乙型肝炎病毒 (HBV) 的免疫接种。他的兄弟和父亲也咳嗽了 2 周。他没有相关的家族病史。
入院时生命体征:体温 37.5°C,脉率 156 次/分钟 (bpm),呼吸频率 30 次/分钟,血氧饱​​和度 (SpO2) 98%。身高 65.0 cm,体重 5992 g。体格检查时,患者显得烦躁不安、面色苍白。前囟门未膨出,无杂音、啰音、腹部异常特征或皮疹。毛细血管再充盈时间为 2 秒内。
血液检查显示 C 反应蛋白 (CRP) 水平略有升高,白细胞 (WBC) 计数增加。但尿液白细胞水平正常,胸片未显示肺炎迹象。脑脊液 (CSF) 中性粒细胞增多,但蛋白质和葡萄糖水平在正常范围内(表 1)。脑部计算机断层扫描未显示异常。
由于上述观察结果怀疑他患有化脓性脑膜炎,因此给予他氨苄西林(300 mg/kg/天)、头孢噻肟(300 mg/kg/天)和地塞米松(0.15 mg/天,4次)。住院第三天他不再发热,一般状况好转。第四天停止抗生素和类固醇治疗,由于病情稳定,第六天他出院。血液、尿液和脑脊液各两个样本的细菌培养检测结果均为阴性。
出院后,我们使用入院时采集的患者脑脊液样本,通过新一代测序 (NGS) 进行宏基因组 RNA(核糖核酸)-Seq 病原体检测 [3]。在总​​共 1,708,516 个读数中,检测到三个与 TTV 中看到的读数同源的短读数。接下来,我们使用患者的 TTV 特异性聚合酶链反应 (PCR) 引物(5′–GGTTTCAGGTAGGTAGACA–3′ 和 5′–GCCGAAGGTGAGTGAAA–3′)在 TaKaRa SYBR® Fast qPCR Mix 中进行定量 PCR (qPCR)。我们发现,与 13 个对照病例的 TTV 阴性脑脊液样本相比,患者呈阳性(图 1)。通过 PCR 扩增和 NGS 检测,TTV 的全基因组序列已确定为 2810 nt,并已存入日本 DNA 数据库 (DDBJ;登录号:LC381845)。
图 1
使用聚合酶链反应检测 Torque Teno 病毒。a使用 Torque Teno 病毒(KS025-脑脊液)特异性引物在脑脊液和骨髓中进行聚合酶链反应检测。为了进行比较,使用了 13 个病例对照。b使用定量逆转录聚合酶链反应检测 Torque Teno 病毒特异性引物(KS025-脑脊液:Ct 28.0)。c在 KS025 的连续血清样本中检测 Torque Teno 病毒。B骨髓、CSF脑脊液、SER连续血清
我们使用 WEPRO7240H 小麦胚芽提取物和 Protemist® DT II 机器人蛋白质合成仪(CellFree Sciences Co.,日本松山)从 TTV 中制备了 His 标记的重组 GP2(270–663 aa 区域,GenBank ID:BBD88555)抗原。我们使用全自动蛋白质印迹检测系统 Wes(ProteinSimple,美国加利福尼亚州圣何塞)测试了患者对特定 GP2 抗原的免疫反应(图 2)。在脑脊液中未检测到 IgM(免疫球蛋白 M)和 IgG(免疫球蛋白 G),尽管血清中两者均为阳性。基本上,血清 IgG 是从母亲那里获得,因此我们无法断定对 TTV 感染的免疫反应;然而,在该患者身上观察到的血清 IgM 反应为 TTV 感染提
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