放线菌髋关节假体感染：一例报告
抽象的
放线菌是人类口咽部微生物群的一部分。它们与腹部、颈面部和胸部感染有关，也有少数关节感染病例被报道。特别是，放线菌 gerencseriae，以前被描述为以色列放线菌 II 型，很少与人类感染有关，主要涉及颈面部病变和牙周疾病。在这里，我们报告了一例由放线菌引起的髋关节假体感染病例。
一名 72 岁的白人男性右大腿外侧出现炎症性积液，该处已植入髋关节假体 11 年。对采集穿刺液样本进行培养发现人型葡萄球菌和一种未通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法 (MALDI-TOF) 鉴定的革兰氏阳性杆菌。对从样本和分离物中扩增的 16S rRNA 基因进行测序，鉴定为 A. gerencseriae。使用阿莫西林和三甲氧苄啶-磺胺甲恶唑进行治疗可治愈感染。
最近描述的A. gerencseriae很少引起人类感染。我们报告了第一例髋关节假体中A. gerencseriae关节感染病例。
介绍
放线菌是口咽部 [1]、消化道 [2] 和泌尿生殖道微生物群 [3] 的共生成员。作为病原体，它们是造成颈面部病变 [4]、腹盆腔感染 [5] 和呼吸道感染 [6] 的病原体。很少有报道称放线菌会导致中枢神经系统 (CNS) 感染、皮肤感染 [7] 和骨和关节感染 [7]。在这个属中，以色列放线菌 II 型已被重新归类为放线菌 gerencseriae，它是人类口腔菌群的共生成员 [8]；它还与颈面部感染 [4]、牙科疾病 [9,10]、放射性骨坏死 [11] 病例有关，但很少引起其他部位的感染 [12]。
这里我们描述了第一例由这种微生物导致的髋关节假体感染病例。
病例介绍
一名 72 岁的白人男性被诊断为右髋关节假体周围感染性血肿。他的病史包括双侧骨关节炎（11 年前植入右髋关节假体和 4 年前植入左髋关节假体后治愈），还有三次心肌梗死，随后植入了十个冠状动脉支架，最近植入了植入式心脏除颤器 (ICD) 并连续接受华法林治疗。后一种药物过量导致右髂腰血肿。在接下来的三个月内，患者出现格林-巴利综合征，在注射免疫球蛋白后迅速缓解，以及胆管炎，通过服用阿莫西林-克拉维酸盐治愈。
同时，他被诊断为右大腿外侧感染性髂腰血肿瘘管，由于其他并发疾病而被忽视。随后用阿莫西林-克拉维酸和夫西地酸治疗了 8 周，没有微生物学记录。四个月后，右髋部积液持续存在，进行了切开引流。对取样液体进行的几项 PCR 检测（包括 16S rRNA 基因扩增 [13]）均为阴性，标准培养为无菌。当时，白细胞计数正常，为 8.4×109/L（中性粒细胞计数为 6.2×109/L），血小板计数为 246×109/L。红细胞沉降率升高至 82mm/小时。八周后取样的第二个样本在含有 5% 羊血的哥伦比亚琼脂（法国马恩拉科凯特的 bioMérieux 公司）上生长出两种菌落，在 37°C 的富含 5% CO2 的厌氧环境中培养。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法 (MALDI-TOF-MS) [14] 可通过质谱进行细菌鉴定，鉴定出一个菌落为人葡萄球菌，鉴定分数为 2.02。然而，第二个菌落的 MALDI-TOF-MS 鉴定失败。然后通过 16S rRNA 基因的 PCR 测序鉴定出该革兰氏阳性杆菌，如前所述 [13]。1,486 bp 序列（GenBank LN624398）与 A 的相似度为 99.2%。使用 NCBI BLAST（http://www.ncbi.nlm.nih.gov）对 A. gerencseriae（Genbank X80414）进行了测序。该分离物存放在 Collection de Souches de l’Unité des Rickettsies (=CSUR P1401)。随后将此 A. gerencseriaeMALDI-TOF-MS 光谱添加到数据库（图 1），以便与数据库中可用的其他八个放线菌光谱进行具体比较（图 2）。对取样液体直接进行 16S rRNA 基因的进一步扩增和测序产生了 999 bp 序列，与 A. gerencseriae（Genbank NR029280）的序列相似性为 98.9%，与分离物（GenBank LN624398）的序列相似性为 99.7%。抗生素治疗方案调整为阿莫西林和甲氧苄啶-磺胺甲恶唑，最低抑菌浓度分别为 0.023mg/L 和 <1mg/L。三周后因肾衰竭停止治疗。进一步的微生物学检查发现金黄色葡萄球菌，最终开出了氧氟沙星联合利福平。
图 1
来自 A. genenceseriaestrain URMITE (= CSUR P1401) 的参考质谱。比较了 12 个单个菌落的光谱，并生成了参考光谱
图 2
凝胶视图比较A. generncseriaestrain URMITE（= CSUR P1401）。凝胶视图显示加载光谱文件的原始光谱，以伪凝胶状排列。x 轴记录 m/z 值。左侧 y 轴显示来自后续光谱加载的运行光谱编号。峰值强度用灰度代码表示。颜色条和右侧 y 轴表示显示的峰值颜色与峰值强度之间的关系（以任意单位表示）。显示的物种显示在左侧，而 URMITE 菌株则以蓝色突出显示
该患者出现髋关节假体混合感染，A. gerencseriae 是三种已记录的微生物之一。两种不同的技术明确证实了这种微生物的存在。因此，穿刺产物中的直接 16S rRNA 基因扩增加强了培养结果，排除了实验室污染，并表明微生物确实存在于采集的样本中。此外，A. gerencseriae[8] 栖息于人类口腔微生物群 [15] 中，但不存在于人类皮肤中，因此手术期间污染的可能性极小。另外，A. genencseriae 不被认为是实验室污染物，我们实验室中没有记录其他病例。因此，我们将 A. genencseriae 解释为该患者髋关节假体混合感染的一部分。
在本例中，A. generncseriaew 被确认为基于两次独立的 16S rRNA 基因 PCR 扩增和测序，这两次扩增和测序产生了相同的部分

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